DNA süljest eraldamise protokoll

1. Kogu sülg suurde (50ml) tuubi. Vedelat osa peaks olema vähemalt 500µl (0,5ml).
2. Lisa väiksesse (1,5ml) tuubi 500µl lüüsipuhvrit ja 500µl kogutud sülge.
3. Sega vortex’il 5 sekundit.
4. (Märgista oma tuub ja) pane tuub 30 minutiks termostaati (56°C), vahepeal vortex’il segades.
5. 30 minuti möödudes lisa proovile 200µl soolalahust ning pane tuub jääle.
6. Hoida tuubi 5 minutit jääl. Lahus läheb piimjaks.
7. Tsentrifuugime tuube 5 minutit. Tekib sade tuubi põhja-küljele ning selle peale jääb vesilahus.
8.  Võta uus 1,5 ml tuub (märgistada!). Pipeteeri 700µl vesilahust vanast tuubist uude tuubi ilma sadet puudutamata (vana tuubi võid nüüd ära visata).
9. Lisa 700µl isopropanooli, tee paar sekundit vortex. Võib tekkida silmale nähtav DNA sade/niit.
10. Hoia tuubi 5 minutit toatemperatuuril.
11. Tsentrifuugime proove 5 minutit.
12. Tuubi küljele/põhja tekib sade (see on DNA!) ning selle peale vesilahus. Eemaldada vesilahus ilma sadet puudutamata.
13. Lisa ~kuiva tuubi 300µl etanooli. Tsentrifuugime tuube 2 minutit. Korrata seda etappi (peale tsentrifuugimist eemalda etanool, lisa uuesti etanooli ning tsentrifuugime uuesti).
14. Eemalda pipetiga etanool ilma sadet puudutamata. Mida kuivem tuub seda parem.
15. Kuivata tuubi, hoides tuubi termostaadis (37°C) avatud kaanega seni, kuni etanooli lõhna enam tunda ei ole (~5-10 minutit).
16. Lahusta DNA sade 50µl vees ning tee vortex.
17. DNA käes (tuubis)!